GE Step （II） 標(biāo)簽蛋白的純化

GE Step (II) 標(biāo)簽蛋白的純化

Strep(II)標(biāo)簽蛋白

Strep(II標(biāo)簽是只有八個(gè)氨基酸 (Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys)的小標(biāo)簽，分子量?jī)H有

1000，通常不需切除。Strep( II )標(biāo)簽可以放在N端或者C端也可以在真核細(xì)胞中表達(dá)，他不能結(jié)合抗生物.素蛋白 (avidin)。為了防止宿主中的生物.素化的蛋白競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到柱子上，造成載量偏低，可以在樣品中加入抗生物.素蛋白屏蔽掉宿主蛋白的干擾。

GE Step (II) 標(biāo)簽蛋白的純化

帶Strep-Tactin配基的strepTrap HP介質(zhì)能特異性的結(jié)合Strep(II)標(biāo)簽蛋白，結(jié)合親和力是鏈霉抗生物.素蛋白結(jié)合親和力的100倍，因此純化strep(II)標(biāo)簽蛋白非常理想。純化過(guò)程在生理?xiàng)l件下進(jìn)行，使用脫硫生物.素溫和程度的洗脫保護(hù)了靶蛋白的活性。大腸桿菌表達(dá)的雙標(biāo)簽蛋白 (His)6-mCherry-Strep(II)的純化，在不同的規(guī)模進(jìn)行制備。

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